Estudos moleculares da sinalização por receptores de quimiocinas

A clarificação da função de receptors de quimiocinas ainda não se encontra totalmente elucidada. Em particular, o trabalho realizado incidiu sobre a caracterização de dois receptores humanos de quimiocinas: CXCR4 e CCR2. Experiências preliminaries sobre o CXCR4 envolveram o desenvolvimento e caracte...

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Detalhes bibliográficos
Autor principal: Campos, Ana Cláudia da Silva (author)
Formato: masterThesis
Idioma:eng
Publicado em: 1000
Assuntos:
Texto completo:http://hdl.handle.net/10773/21850
País:Portugal
Oai:oai:ria.ua.pt:10773/21850
Descrição
Resumo:A clarificação da função de receptors de quimiocinas ainda não se encontra totalmente elucidada. Em particular, o trabalho realizado incidiu sobre a caracterização de dois receptores humanos de quimiocinas: CXCR4 e CCR2. Experiências preliminaries sobre o CXCR4 envolveram o desenvolvimento e caracterização de um novo anticorpo policlonal SZ1397. As condições de transfecção, imunoprecipitação e detecção de amostras derivadas das linhas celulares J-Jahn, 300-19 e COS-7 foram optimizadas. O anticorpo anti-CXCR4, SZ1397, permitiu a detecção do receptor humano transfectado e endógeno. Desta forma, foi possível determinar que este receptor migra em SDS-PAGE com o peso molecular aparente de 40KDa. Adicionalmente, foram parcialmente caracterizadas e definidas importantes diferenças na via de transdução de sinal iniciada por dois ligandos do CCR2: o agonista MCP-1 e o antagonista eotaxina. Estes ligandos induzem a activação da cinase regulada por sinais extracelulares (ERK). Contudo, observou-se que a fosfatidilinositol 3- cinase é essencial para a activação da ERK, após estimulação com eotaxina, contrariamente ao que ocorre após estimulação com MCP-1. A activação da ERK pelos dois ligandos implica também a activação da cinase da ERK (MEK) e da c-Raf.